Folin酚测定蛋白质含量制定的标准曲线为什么不过原点


这是曲线制作过程:取12支试管,分别加入0, 0.2 , 0.4, 0.6, 0.8, 1.0毫升标准酪蛋白溶液(500微克/毫升)则慎用水补足到1.0毫升,以上每种浓度各做一份重复,即平行做两份,按顺序向各管加入3毫升Folin—酚试孙颤敬剂甲,混匀,室温下放置10分钟,再依次向各管加入0.3毫升Folin—酚试剂乙,立即摇匀,在30℃保温(或室温下放置)30分钟,然后于500nm处比色。看两个平行管的光密度值是否接近,取其平均值,以光密度(0.D)为纵坐标,以酪蛋白溶液浓度为横坐标,绘制酪蛋白的标准曲线

你看它的纵坐标为光密度,你的溶液里酪蛋白加入为0的时候,还是加入了Folin—酚试剂甲乙,所以溶液中存在溶质,就会存在一定的光密度,所以说标准曲线肯定就不过原点啦~

给你补充一下~

<科技编辑大辞典》对光密度的定义是:入射光强度与透射光强度之比值的常用对数值。专业书籍则这样解释“吸光度”:入射光和透射光的透过率之洞旦比值的常用对数值,也称光密度。分析可见,两个概念其实是一致的,“光密度”就是“吸光度”

而吸光度是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的对数,影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关。

这样你应该能理解为什么光密度不为零了吧~既然光密度不为零,那么这个曲线是不过原点的

【这是我个人的见解,你可以参考一下~】