需要过程
是一个
生物性质的实验.
不用碘进行检验
用其他的试剂，
化学试剂
谢谢！
水果、蔬菜维生素C含量测定法(2,6－二氯靛酚滴定法)
中华人民共和国国家标准 UDC 634.1/.8 :635.1/.8
水果、蔬菜维生素C含量测定法 :543 (2,6－二氯靛酚滴定法) GB 6195-86
Determination of vitamin C in vegetables and fruits (2,6-dichloro-indophenol titration method)
1 适用范围 本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价 锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐),不适用于深色样品。
2 测定原理 染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化让腔态为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。 用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。
3 仪器设备 a. 高速组织捣碎机:8000～12000r/min。 b. 分析天平。 c. 滴定管:25ml、10ml。 d. 容量瓶:100ml。 e. 锥形瓶:100ml、50ml。 f. 吸管:10ml、5ml、2ml、1ml。 g. 烧杯:250ml、50ml。 h. 漏斗。
4 试剂(凡未加说明者均为分析纯)
4.1 浸提剂
4.1.1 偏磷酸:2%溶液(W/V)* ,
4.1.2 草酸:2%溶液(W/V)。
4.2 抗坏血酸标准溶液(1mg/ml):称取 100mg(准确至 0.1mg)抗坏血酸**,溶于浸提剂中并稀至100ml。现配现用。
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* 偏磷酸不稳定,切勿加热。
** 一般抗坏血酸纯度为99.5%以上,可不标定。如试剂发黄,则弃去不用。若要检查其纯度,可按附录B方法标定。
4.3 2,6－二氯靛酚(2,6－二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液:称取碳酸氢钠52mg溶解在200ml热蒸馏水中,然后称取 2,6－二氯靛酚 50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至250ml,过滤至棕色瓶内,保存在冰箱中。每次使用前,用标准抗坏血酸标定其滴定度。即吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中,加入10ml浸提剂,摇匀,用2,6－二氯靛酚溶 液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时,另取 10ml浸提剂粗顷做空白试验。滴定度按式(1)计算:
C·V
滴定度 T(mg/ml)＝─────………………………… (1)
V1－V2
式中: T-─每毫升2,6－二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数; C-─抗坏血酸的浓度,mg/ml; V-─吸取抗坏血酸的体积, ml; V1-─滴定抗坏血酸溶液所用 2,6－二氯靛酚溶液的体积,ml; V2-─滴定空白所用2,6－二氯靛酚溶液的体积,ml。
4.4 白陶土(或称高岭土),对维生素C无吸附性。
5 测定步骤
5.1 样液制备:称取具有代表性样品的可食部分100g,放入组织捣碎机中,加 100ml浸 提剂,迅速捣成匀浆。称 10～40g浆状样品,用浸提剂将样品移入 100ml容量瓶,并稀释 至刻度,摇匀过滤。若滤液有色,可按每克样品加 0.4g白陶土脱色后再过滤。
5.2 滴定:吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中,用已标定过的 2,6－二氯靛酚溶液滴定,直至溶液呈粉红色 15s不褪色为止。同时做空白试验。
6 结果计算
6.1 计算公式: 维生素 C按式(2)计算:
(V－V0)·T·A
维生素C(mg/100g)＝────────-×100 …………………(2)
岩滑陆 W
式中: V--滴定样液时消耗染料溶液的体积,ml; V0--滴定空白时消耗染料溶液的体积,ml;T--2,6－二氯靛酚染料滴定度,mg/ml; A--稀释倍数; W--样品重量,g。
6.2 平行测定的结果,用算术平均值表示,取三位有效数字,含量低的保留小数点后两位数字。
6.3 平行测定结果的相对相差,在维生素C含量大于20mg/100g时,不得超过2%,小于 20mg/100g时,不得超过 5%。